Исследовательская группа под руководством профессора НИШИМУРА Нориюки (Высшая школа медицинских наук, Университет Кобе) разработала новый метод мониторинга остаточного заболевания после лечения у пациентов с нейробластомой высокого риска. Этот метод можно использовать для оценки реакции на лечение и облегчения ранней диагностики рецидива / повторного роста опухоли.
Этот метод мониторинга был разработан группой, состоящей из доцента ЯМАМОТО Нобуюки и доцента проекта УЭМУРА Сугуру (оба из Высшей школы медицины Университета Кобе) и из детской больницы префектуры Хёго в Кобе; Заместитель директора д-р. КОСАКА Ёсиюки, заведующий отделением д-р. ХАСЕГАВА Дайитиро и главный врач д-р. ИШИДА Тошиаки. SYSMEX также оказывала исследовательское сотрудничество и поддержку.
Эти результаты были впервые опубликованы в Журнале молекулярной диагностики 11 декабря 2019 г.
Нейробластома – это тип рака, который поражает детей. Он характеризуется солидными опухолями, которые развиваются из незрелых нервных клеток симпатической нервной системы, обычно в надпочечниках и вокруг них. Более 50% пациентов с нейробластомой высокого риска испытывают рецидив или возобновление роста опухоли, а их долгосрочная выживаемость составляет всего 40%. Устранение MRD имеет жизненно важное значение для поддержания эффективности лечения и улучшения прогноза пациентов, поэтому использовались различные методы мониторинга.
До сих пор методы мониторинга оценивали MRD с помощью ПЦР в реальном времени (qPCR). Этот мониторинг включал измерение уровней различных маркеров, связанных с нейробластомой, высокие уровни которых указывают на развитие клеток нейробластомы в раковых и незлокачественных стволовых клетках.
Настоящее исследование направлено на более точную оценку этих патологических изменений. Из ассоциированных с нейробластом маркеров, которые высоко экспрессируются в клетках нейробластомы, исследовательская группа выбрала семь маркеров, которые особенно распространены в раковых стволовых клетках, вызывающих рецидив / повторный рост опухоли. Чтобы определить уровни этих семи маркеров, исследовательская группа использовала цифровую ПЦР с каплями (ddPCR), которая обеспечивает более чувствительный и воспроизводимый способ измерения этих маркеров в образце, чем qPCR.
Эта исследовательская группа ранее разработала систему на основе количественной ПЦР, которая использовалась для определения уровней одиннадцати маркеров, связанных с раковыми стволовыми клетками, которые вызывают рецидив нейробластомы. Этот метод позволил им контролировать МОБ у пациентов с нейробластомой высокого риска. Однако было сложно точно отследить происходящие изменения с помощью qPCR. В текущем исследовании исследовательская группа решила использовать более чувствительную и воспроизводимую ddPCR для оценки MRD.
Прежде всего, 208 образцов костного мозга и 67 образцов периферической крови были взяты у пациентов с нейробластомой высокого риска, а 103 образца костного мозга и 107 образцов периферической крови были взяты у здоровых людей (контроль). Семь маркеров были выбраны из одиннадцати маркеров, которые высоко экспрессируются в раковых стволовых клетках, вызывающих повторный рост / рецидив нейробластомы. Используя ddPCR, они рассчитали уровни этих семи маркеров в образцах костного мозга и периферической крови.
Исследовательская группа обнаружила, что они могут более точно диагностировать пациентов с нейробластомой высокого риска при вычислении агрегированных уровней экспрессии всех семи маркеров с помощью ddPCR, в отличие от анализа уровня экспрессии каждого маркера по отдельности. Изменения уровней экспрессии этих семи маркеров отражали количество опухолей, стадию заболевания (ремиссия, стабильная или прогрессирующая) и период сбора образцов (диагностика, лечение, после лечения или рецидив).
Уровни экспрессии семи маркеров были рассчитаны для 73 образцов костного мозга, полученных от пациентов с нейробластомой высокого риска после лечения. Уровни экспрессии маркеров в образцах костного мозга 17 пациентов, перенесших рецидив / возобновление роста опухоли, были значительно выше по сравнению с уровнями у 56 пациентов, у которых не было опухоли. Сравнивая два метода ПЦР с использованием тех же 73 образцов, было предсказано, что уровни экспрессии семи маркеров, рассчитанные с помощью ddPCR, смогут более точно предсказать рецидив / повторный рост опухоли, чем qPCR.
На основании этих результатов ожидается, что метод мониторинга ddPCR, разработанный в этом исследовании, улучшит мониторинг MRD у пациентов с нейробластомой высокого риска, что позволит более точно предсказать возможность рецидива или возобновления роста опухоли.
Результаты этого исследования показывают, что можно точно контролировать МОБ у пациентов с нейробластомой высокого риска после лечения. Затем эту методологию необходимо оценить с помощью проспективных клинических исследований на большем количестве пациентов в нескольких больницах. Ожидается, что этот метод мониторинга может быть использован в качестве основы для прогнозирования прогнозов пациентов и разработки новых методов лечения пациентов с нейробластомой высокого риска.