Простой протокол для оценки созревания HPC из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток

Простой протокол для оценки созревания HPC из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток

Исследователи разработали руководство, которое поможет лабораториям стандартизировать производство зрелых печеночно-подобных клеток (HPC) из стволовых клеток и легко сравнить экспрессию генов HPC с реальной тканью печени человека. Этот протокол с умеренно высокой пропускной способностью может позволить относительно быструю оценку эффективности дифференцировки стволовых клеток и помочь в оптимизации условий дифференцировки в приложениях регенеративной медицины. Протокол и его значение опубликованы в Stem Cells and Development.

"Руководство по оценке экспрессии зрелых генов печени в гепатоцитах, полученных из стволовых клеток" соавторами Стивен Стром, Каролинский институт (Стокгольм, Швеция) и Алехандро Сото-Гутьеррес, Университет Питтсбурга (Пенсильвания), а также коллеги из Каролинского института, Роянского института биологии стволовых клеток (Тегеран, Иран) и Университета Питтсбурга. Исследователи использовали количественную полимеразную цепную реакцию в реальном времени (rt-qPCR), чтобы определить экспрессию мРНК более 60 генов, экспрессированных в образцах печени плода и зрелого человека, нормализованную к внутреннему контролю. Они измерили экспрессию генов в iPC, произведенных в их собственной лаборатории, и в тех, которые были приобретены в коммерческих лабораториях. Оцениваемые гены включали гены специфичных для печени белков плазмы, ферментов цитохрома P450, транспортеров, белков, устойчивых к множественным лекарствам, а также гены, необходимые для плюрипотентности и способности iPC дифференцироваться в разные типы клеток.

Грэм С. Паркер, доктор философии.D., Главный редактор публикаций «Стволовые клетки и развитие» и «Отделение педиатрии Карман и Энн Адамс» Медицинского факультета Университета Уэйна, Детройт, Мичиган, заявляет: "Способность направлять дифференцировку популяции стволовых клеток к целевому типу зрелых клеток и демонстрировать стойкость и обоснованность этого достижения все еще находится за пределами компетенции большинства биологов стволовых клеток, и, что еще более тревожно, эта область продолжает допускать предположение, что данная статья достигла этого без доказательства. В своей знаменательной статье Стивен Стром и его коллеги предлагают другим лабораториям эталонный метод для сравнения гепатоцитоподобных клеток, полученных из стволовых клеток, с реальными образцами печени человека."